月季是薔薇屬的木本花卉,有“花中皇后”的美譽,深受人們的喜歡.為我國十臺甫花之一,在我國有30多個城市將其選為市花?？购录臼墙鼛啄赀x育出來的能夠適應北方嚴寒天氣特點的新的月季品種,以其花大,色艷、花期長被北方園林綠化彩化中普遍應用，但由于其繁殖以扦插繁殖為主，繁殖速度慢，滿足不了生發(fā)生長的需要，而組織培育可在短期內得到大量的優(yōu)良種苗，為此，我們于2003~2021年開展了抗寒月季組培快繁的研究工作。1材料與方式1.1材料 試驗所用的材料為長春市園林科學研究所抗寒月季基地抗寒月季新品種。1.2方式1．2．1外植體的準備 取生長結實優(yōu)良母株上帶有腋芽的嫩莖，摘除葉片和嫩刺，用自來水沖洗清潔后，用浸有75%的酒精棉球擦拭外面5~10S，剪成3~5cm左右的莖段，在超凈工作臺上，用0.1%升汞溶液消毒10~12分，無菌水沖洗3~5次，再用無菌濾紙吸干外面水分，切成帶有1個或2個腋芽的莖段接種到培育基中。1．2．2腋芽的分化與增殖 把外植體劃分接種于添加6-BA和NAA的MS培育基上舉行起始培育，誘導腋芽萌發(fā)成立無菌快速繁殖無性系，再將無菌小苗剪切成1~2cm左右的小段接種到添加不同6-BA和NAA的MS培育基中舉行繼代增殖培育，培育一準時間后對小苗的增殖與生長情況舉行觀測統(tǒng)計分解，培育基含30g/l糖、8g/l瓊脂、pH值5.8~6.5、培育溫度(25+-3)，每天光照為11~12小時，光照強度1000~1500LX。1．2．3生根與移栽 將增殖后長勢興旺、節(jié)間紳長適度的無根小苗轉接到1/2MS培育基中誘導生根，30天后觀測生根情況。 生根后的試管苗在常溫下煉苗5~7天，移栽到草碳+珍珠巖(體積比為1∶1)的基質中，待成活后小苗高達10cm左右移到田間栽植。2效果與討論2．1腋芽分化 將外植體接種到MS+2.0mg/l6-BA+0.1mg/lNAA的培育基上培育7天后，大部格外植體開始萌動，10天腋芽膨大顯著，隨后長出嫩芽形成無根芽從。 為選擇出不同質量濃度6-BA對誘導腋芽分化的影響，以MS為基本培育基配制7種附加不同質量濃度(劃分為0.10.51.01.52.03.04.0)的6-BA與0.1mg/lNAA配組的腋芽誘導培育基,每組培育基接種40個外植體,培育40天觀測其腋芽分化情況(見表1)。 表1解釋,月季腋芽分化率與培育基中6-BA質量濃度呈拋物線關系,6-BA由0.1增添至3.0時腋芽分化率顯著提高,以3.0為較高,腋芽分化率達77.5%;當6-BA的質量繼續(xù)增添時,其腋芽分化率則顯著下降;6-BA質量濃度為0.1時其腋芽分化率較低,僅為7.5%;6-BA質量濃度為5.0時,其腋芽分化率只為15%,可見,培育基中6-BA質量濃度為1.5~3.0時有利于誘導腋芽分化,尤其以2.0~3.0時為較佳。2.2繼代增殖培育 取自統(tǒng)一種培育基上長勢、大小平等的繼代培育芽和莖段，同時接種到不同質量濃度的6-BA、NAA的MS培育基中，培育30天后舉行觀測并統(tǒng)計效果(見表2)。 由表2可以看出，在NAA質量濃度相同而6-BA質量濃度不同的處理中，隨著6-BA濃度的升高(1.5~3.0)芽苗的增殖倍數(shù)也相應提高，NAA為0.05~0.1、6-BA為3.0的處理芽苗增殖倍數(shù)高達6.6~6.8倍；可見，培育基中6-BA質量濃度為3.0、NAA質量濃度為0.05時為較佳的誘導腋芽分化的處理組合。2．3生根培育 無菌芽苗在分化與增殖培育基中只誘導地上部門，既不停地分枝增殖，曾多次出現(xiàn)現(xiàn)蕾、開花現(xiàn)象，但均不易生根。因此，將原來培育基中的大量元素減半(既1/2MS)，并去除BA舉行根的誘導。效果在無菌苗根的誘導歷程中，生長素的種類和使用濃度起決議性作用，為此對不同種類的生長素NAA、IBA、A、IAA的根效應作對比試驗，效果解釋，NAA、IBA匹敵寒月季無菌苗誘根效應顯著優(yōu)于IAA，但兩者之間不同不顯著，用IAA舉行根的誘導，芽苗基部長出較多的愈傷組織，發(fā)根率低，且發(fā)根量少，移栽成活率下降，這可能是由于生長過多的愈傷組織影響根系維牽制的發(fā)育所致，為為了解NAA和IBA的適宜質量濃度，舉行了NAA和IBA的質量濃度試驗，劃分設置0.1、0.2、0.3、0.5、0.75、1.0、1.5等7種質量濃度舉行比較，培育30天后觀測根系生長情況，表3解釋，以1/2MS(大量元素用量減半)+NAA和1/2MS(大量元素用量減半)+IBA培育基對月季根的誘導效果均較為理想，而且濃度都在0.3-0.75mg/l范圍內較為適合，但以NAA為較佳。其中NAA生根率較高達92%，移栽成活率高達89%，IBA的生根率也高達90%，移栽成活率達87%。 將小苗接種到上述培育基中10天后其基部傷口基本愈合，18天則長出許多小白根，培育30天發(fā)根率均達90%以上，且長有3條以上，長度達2.0cm以上白根的占80%以上。2．4煉苗移栽 在生根培育基中，無菌苗生長迅速，植株逐漸結實起來，其根系生長尤為迅速，在多數(shù)根系長達1.0cm，其根尖仍保持興旺生長狀態(tài)，此時即可進入太過種植(煉苗)階段，移栽前先將瓶苗移出恒溫培育室，在常溫下置于較強散射光中煉苗7天，打開瓶蓋后繼續(xù)煉苗2~7天，然后小心取出放入清水中洗濯清潔，注重少傷根，移栽到以草碳土+珍珠巖(體積比1∶1)的基質中，澆透水并覆蓋塑料膜，保持相對濕度85~90%，溫度15~25℃，10天后逐漸揭膜煉苗，15~20天可將塑料膜所有揭除，并澆施營養(yǎng)液彌補營養(yǎng)，其成活率一般可達70%以上，待小苗長至10~15cm左右時，就可移植到田間定植。