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一、植物
竹節(jié)秋海棠(b.president-carnot)
二、質(zhì)料種別
葉片、葉柄、莖段
三、培育條件
以ms為基本培育基。誘導(dǎo)愈傷組織培育基:(1)ms+ba3――5mg/l(單元下同)+naa0.1――0.5。叢生芽增殖培育基。(2)ms+ba1.0+naa0.1。(3)ms十ba0.5十naa0.1。(4)壯苗培育基:1/2ms(液體)。(5)誘導(dǎo)生根培育基:1/2ms+naa0.2。上述培育基均加3.0%蔗糖、0.8%瓊脂,ph值5.8。培育溫度(24±2)℃,光照不宜過強(qiáng),有80olx左右即可,光照10h/d。
四、生長與分化情況
(一)無菌質(zhì)料得到將竹節(jié)秋海棠已平展之幼嫩葉片、葉柄、莖段先用適量洗衣粉對水洗滌,然后用自來水頻頻沖洗,于無菌條件下用75%酒精藥棉擦拭清潔,放于飽和漂白粉溶液10分鐘,后置于0.1%升汞溶液中消毒2分鐘,用無菌水沖洗5――6次,消毒濾紙吸收干外面水分,葉片切成0.5cm見方小塊,葉柄、莖段則切成約長1cm左右長條,均接種于培育基(1)上。
(二)叢芽的誘導(dǎo)與增殖接種、培育1周后,葉、葉柄、莖段周圍開始膨大、增厚,質(zhì)地變硬,逐漸形式黃綠色愈傷組織,3周后逐漸分化出小芽點(diǎn),芽點(diǎn)繼續(xù)生長,約5周左右形成顯著的叢生芽。將叢生芽切成小塊,接種于(2)和(3)培育基上舉行增殖,小芽叢上不停分化出許多幼芽。葉、葉柄、莖段在兩個培育基上增殖速度基真相同,約4周左右繼代1次,增殖系數(shù)可達(dá)6――9。
(三)壯苗在舉行大量增殖階段后,我們截至固體培育而改為液培,將分化芽轉(zhuǎn)接到1/2ms,3周后,可發(fā)現(xiàn)生長結(jié)實(shí)、個體粗壯的無根苗。這為以后生根、移苗出瓶,提高適應(yīng)外界環(huán)境,加強(qiáng)抗病能力,提供了良好條件,移栽更易成活。
(四)根的誘導(dǎo)將高約3cm、生長健碩的無根壯苗,接種到培育基(5)上。2周后,苗基部長出輻射狀白色小根,每株生根5―7條,3周后,根伸長至1.0―1.5cm,生根率達(dá)100%。
(五)試管苗的移栽將培育有試管苗的三角瓶蓋打開,在實(shí)驗(yàn)室透風(fēng)處煉苗3d,取出小苗,洗去根部殘留培育基,栽植前根部在0.2%na2so4溶液中滯留片晌。移栽到用高壓滅菌消毒過的蛭石+細(xì)沙+園土(1:1:1)的夾雜基質(zhì)中,地上部噴施0.1%多菌靈溶液,用薄膜覆蓋,每天噴水2次,1周后揭膜,成活率在95%以上。
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